溫度：CellWorld細(xì)胞凍存液通常需要在-20℃避光條件下儲(chǔ)存，以確保其穩(wěn)定性和有效期（一般為24個(gè)月）。在初次融化后，若未使用完畢，可在2~8℃避光條件下保存至少1個(gè)月，少量蛋白析出不影響凍存效果。

容器：CellWorld細(xì)胞凍存液通常以50ml/瓶的規(guī)格提供，應(yīng)確保容器密封良好，避免污染。

使用方法

細(xì)胞準(zhǔn)備：

在凍存前，請(qǐng)確保細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期，這是細(xì)胞凍存的最佳時(shí)期。

移除舊培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞兩次，以去除殘留的血清和代謝產(chǎn)物。

使用胰酶消化細(xì)胞，制備成細(xì)胞懸液。

細(xì)胞計(jì)數(shù)與凍存液配制：

對(duì)細(xì)胞懸液進(jìn)行計(jì)數(shù)，以確定細(xì)胞總數(shù)和所需細(xì)胞凍存液的量。

細(xì)胞的凍存密度通常建議為1×107 cells/mL。

根據(jù)細(xì)胞數(shù)量，計(jì)算出所需的細(xì)胞凍存液體積。

細(xì)胞凍存：

將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)碾x心管中，進(jìn)行離心以收集細(xì)胞。

棄去上清液，加入適量的CellWorld細(xì)胞凍存液，輕輕吹打以重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞懸液分裝至無菌細(xì)胞凍存管中，每管通常含1~10×10^6 cells/mL。

密封并標(biāo)記凍存管，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期等信息。

按照常規(guī)操作流程，將凍存管依次置于4℃、-20℃、-80℃進(jìn)行逐級(jí)降溫，或直接置于-80℃冰箱中儲(chǔ)存至少一年；或者-80℃過夜后，次日將細(xì)胞投入液氮中長期儲(chǔ)存。在液氮中，細(xì)胞可保存數(shù)年或更長時(shí)間。

注意事項(xiàng)：

在整個(gè)凍存過程中，請(qǐng)盡量在冰袋附近操作，以保持低溫環(huán)境，避免保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞造成損傷。

請(qǐng)確保細(xì)胞凍存管密封，避免在復(fù)蘇過程中因壓力變化導(dǎo)致凍存管炸裂。

在取用凍存液時(shí)，應(yīng)在超凈工作臺(tái)內(nèi)無菌操作，確保無菌條件。

復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，應(yīng)從液氮罐或-80℃冰箱中迅速取出凍存管，立即放入37℃水浴中快速解凍，避免冰晶重新結(jié)晶而造成細(xì)胞死亡。

CellWorld細(xì)胞凍存液以其高效、穩(wěn)定、方便的特點(diǎn)，為細(xì)胞保存提供了可靠的解決方案。在使用時(shí)，請(qǐng)嚴(yán)格按照上述方法和注意事項(xiàng)進(jìn)行操作，以確保細(xì)胞的存活率和穩(wěn)定性。